Урсгалын цитометр дэх шүүлтүүрийн хэрэглээ.

(Урсгалын цитометр, FCM) нь будсан эсийн маркеруудын флюресценцийн эрчмийг хэмждэг эсийн анализатор юм. Энэ нь дан эсийг шинжилж, ялгах үндсэн дээр боловсруулсан өндөр технологийн технологи юм. Энэ нь эсийн хэмжээ, дотоод бүтэц, ДНХ, РНХ, уураг, эсрэгтөрөгч болон бусад физик, химийн шинж чанарыг хурдан хэмжиж, ангилах боломжтой бөгөөд эдгээр ангиллын цуглуулгад үндэслэж болно.

图片1

Урсгалын цитометр нь үндсэндээ дараах таван хэсгээс бүрдэнэ.

1 Урсгалын камер ба шингэний систем

2 Лазер гэрлийн эх үүсвэр ба цацраг хэлбэржүүлэх систем

3 Оптик систем

4 Электрон, хадгалалт, дэлгэц, шинжилгээний систем

5 Эс ангилах систем

图片2

Тэдгээрийн дотроос лазерын гэрлийн эх үүсвэр ба цацраг үүсгэх систем дэх лазерын өдөөлт нь урсгалын цитометр дэх флюресценцийн дохионы гол хэмжүүр юм. Өдөөлтийн гэрлийн эрч хүч ба өртөх хугацаа нь флюресценцийн дохионы эрчимтэй холбоотой байдаг. Лазер бол нэг долгионы урттай, өндөр эрчимтэй, өндөр тогтвортой гэрэлтүүлгийг өгөх боломжтой уялдаатай гэрлийн эх үүсвэр юм. Энэ нь эдгээр шаардлагыг хангахад хамгийн тохиромжтой өдөөх гэрлийн эх үүсвэр юм.

图片3

Лазерын эх үүсвэр ба урсгалын камерын хооронд хоёр цилиндр хэлбэртэй линз байдаг. Эдгээр линз нь лазерын эх үүсвэрээс ялгарах дугуй хөндлөн огтлолтой лазер туяаг жижиг хөндлөн огтлолтой (22 μm × 66 μm) эллипс туяанд төвлөрүүлдэг. Энэхүү зууван туяа доторх лазерын энерги нь хэвийн тархалтын дагуу тархаж, лазер илрүүлэх бүсээр дамжин өнгөрч буй эсүүдэд тогтмол гэрэлтүүлгийн эрчмийг хангадаг. Нөгөөтэйгүүр, оптик систем нь олон тооны линз, цооног, шүүлтүүрээс бүрдэх бөгөөд тэдгээрийг урсгалын камерын дээд ба доош гэсэн хоёр бүлэгт хувааж болно.

图片4

Урсгалын камерын өмнө байрлах оптик систем нь линз ба нүхнээс бүрдэнэ. Линз ба нүхний гол үүрэг (ихэвчлэн хоёр линз ба зүү) нь лазерын эх үүсвэрээс ялгарах дугуй хөндлөн огтлолтой лазер туяаг жижиг хөндлөн огтлолтой эллипс туяанд төвлөрүүлэх явдал юм. Энэ нь лазерын энергийг хэвийн хуваарилалтын дагуу хуваарилж, лазер илрүүлэх хэсгийн эсүүдэд тогтмол гэрэлтүүлгийн эрчмийг хангаж, төөрсөн гэрлийн хөндлөнгийн оролцоог багасгадаг.

 

Үндсэн гурван төрлийн шүүлтүүр байдаг: 

1: Урт дамжуулагч шүүлтүүр (LPF) - зөвхөн тодорхой утгаас илүү долгионы урттай гэрлийг нэвтрүүлэхийг зөвшөөрдөг.

2: Богино нэвтрүүлэх шүүлтүүр (SPF) - зөвхөн тодорхой утгаас доогуур долгионы урттай гэрлийг нэвтрүүлэхийг зөвшөөрдөг.

3: Bandpass filter (BPF) - зөвхөн тодорхой долгионы урттай гэрлийг нэвтрүүлэх боломжийг олгодог.

Шүүлтүүрийн янз бүрийн хослолууд нь янз бүрийн долгионы урттай флюресценцийн дохиог бие даасан фото үржүүлэгч хоолой (PMTs) руу чиглүүлж чаддаг. Жишээлбэл, PMT-ийн өмнө ногоон флюресцент (FITC) илрүүлэх шүүлтүүр нь LPF550 ба BPF525 юм. PMT-ийн өмнө улбар шар-улаан флюресценцийг (PE) илрүүлэхэд ашигладаг шүүлтүүрүүд нь LPF600 ба BPF575 юм. PMT-ийн урд байрлах улаан флюресценцийг (CY5) илрүүлэх шүүлтүүр нь LPF650 ба BPF675 юм.

图片5

Урсгалын цитометрийг голчлон эсийг ялгахад ашигладаг. Компьютерийн технологи хөгжихийн хэрээр дархлаа судлалын хөгжил, моноклональ эсрэгбиеийн технологийг зохион бүтээсэн нь биологи, анагаах ухаан, эм зүй болон бусад салбарт хэрэглэх нь улам бүр түгээмэл болж байна. Эдгээр хэрэглээнд эсийн динамикийн шинжилгээ, эсийн апоптоз, эсийн төрөл, хавдрын оношлогоо, эмийн үр дүнтэй байдлын шинжилгээ гэх мэт орно.


Шуудангийн цаг: 2023 оны 9-р сарын 21